关于PCR生物实验，相信大家都听过，它是体外模拟生物的DNA复制。需要DNA聚合酶，DNA模板，两个引物，脱氧核苷酸dNTP(dATP，ACTP，dGTP，dTTP)和合适的缓冲液系统。qPCR mix实验是怎么进行的?下面，我们来了解一下。

PCR产物的生长形式为2 N(如果各种试剂和外部条件理想化，N为循环数)。实际上，放大效率不是100%。实时PCR是定量PCR的一种，它当然是在PCR的基础上开发的。 (正常)PCR包含许多因素，例如：试剂，温度，循环数，程序，PCR产物的量(扩增子)，扩增曲线(扩增子积累曲线)，错误率，扩增子长度。

通常，人们注意扩增子的数量。实时荧光定量PCR主要利用扩增曲线和循环数。还考虑了扩增子的长度，扩增效率和扩增子数。扩增后(与循环数无关)，通过电泳和染色进行常规PCR。这对于判断目标DNA是否存在非常有用。但是，很难检测出目标DNA有多少个分子(初始时间)。因为理想的PCR距离实际PCR还很远。学术界普遍认为，由于起始材料，酶和抑制剂(抑制PCR的因子，例如dNTPs分解生成焦磷酸盐)的量足够，PCR非常适合多个初始PCR循环。后置放大器加倍。但是，在某些时候，原料和酶相对于模板大大减少，抑制剂浓度相对较高，PCR的效率降至零。因此，实际的放大曲线是“ S”型，而不是“ J”型。

PCR系统执行1、2、3 ... 40个循环，然后使用定量方法(例如OD)来了解产生了多少个扩增子。

由于没有直接的定量方法可以检测少量的DNA(1到数千?)，因此在扩增曲线的前几个循环中，扩增子的数量标记为0，这表明很难与背景干扰区分开。打开。实时PCR也不能直接测量原始DNA中的分子数量。但是，它使用PCR中间的数据，比定量更准确。(更接近理想情况。)